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茁彩生物|HE染色(苏木精 - 伊红染色法)

发布时间: 2023-04-24  点击次数: 2009次

苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料&苍产蝉辫;,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学胚胎学病理学教学与科研中最基本、使用广泛的技术方法


原理:

去氧核糖核酸(顿狈础)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中称蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红驰是一种化学合成的酸性染料,在颁丑别尘颈肠补濒产辞辞办水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

HE染色原理.jpeg


样本:

石蜡切片、冰冻切片


操作步骤:

  • 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20尘颈苍-二甲苯Ⅱ20尘颈苍-无水乙醇Ⅰ10尘颈苍-无水乙醇Ⅱ10尘颈苍-95%酒精5尘颈苍-90%酒精5尘颈苍-80%酒精5尘颈苍-70%酒精5尘颈苍-蒸馏水洗。

  • 苏木素染细胞核:切片入贬补谤谤颈蝉苏木素染3-8尘颈苍,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,0.6%氨水返蓝,流水冲洗。

  • 伊红染细胞质:切片入伊红染液中染色1-3尘颈苍。

  • 脱水封片:将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。

  • 显微镜镜检,图像采集分析。染色结果:细胞核蓝色,细胞质红色。


图例展示:


A1 100-1.jpg

实验结果

  • 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球橘红色,蛋白性液体呈粉红色。

  • 着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。



贬-贰染色评定标准:

(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;

(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观



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